- 著者
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池谷 守司
岩澤 敏幸
鈴木 滋
- 出版者
- 静岡県中小家畜試験場
- 雑誌
- 静岡県中小家畜試験場研究報告 (ISSN:09146520)
- 巻号頁・発行日
- no.16, pp.43-47, 2005-12
- 被引用文献数
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ブタ未成熟卵母細胞はTCM-199中で卵核胞期の状態で保存可能であるが、本研究では保存した卵母細胞をレシピエントとした核移植を行い、活性化時間および胚盤胞までの発生率について調査した。と畜場由来ブタ卵巣から採取した未成熟卵母細胞は、20mMHepesおよび10%ウシ胎子血清添加Hanks塩TCM-199にて37℃、空気中で24~28時間保存培養後、NCSU37にて体外成熟培養を37~41時間行った(保存区)。保存培養せずに成熟培養したものを対照区とした。除核および体細胞核の移植は既報に準じ、デュロック種と金華豚の交雑種由来およびGFP遺伝子を導入した金華豚の細胞核を、ピエゾマイクロマニュピュレーターを用いて体外成熟卵子細胞質内に直接移植した。活性化処理は成熟培養開始から48(48時間区)または52時間(52時間区)後に行い、0.3%PVA添加PZMで110時間培養後の発生について観察後、借り腹豚に外科的移植を行った。桑実胚~胚盤胞への発生率は、保存区と対照区の両区で活性化時間による差は認められなかったが、DJ由来の核移植卵子では、48時間区で、保存区が、対照区より有意に高い発生率が得られた。産子は、対照区では、48時間区で1頭、保存区では、48時間区で1頭、52時間区で3頭得られた。TCM-199で一時的に保存したブタ卵母細胞をレシピエントとした核移植により、桑実~胚盤胞期肢を作出可能であることが明らかとなった。