1 0 0 0 OA 幹細胞による神経筋疾患の遺伝子治療
本研究の目的は"神経筋難病の幹細胞/遺伝子治療法の開発"、特に難病・筋ジストロフィーをターゲットに定め、病的骨格筋に治療用蛋白質"dystrophin"を導入する(replacement therapy)ことである。治療研究に用いるウイルスベクターの作成及びその機能の確認をおこなった:マーカー遺伝子(LacZ,eGFP)、複数の短縮型dystrophinとdystrophin/eGFP fusion遺伝子、骨格筋への特異的分化誘導を促す因子(MyoD,Pax7)などである。CMV,RSV,CAGなどの非特異的プロモーター以外に、骨格筋特異的なHuman Skeletal a-actin gene promoter (HSA),CK6(modified Creatinin Kinase promoter 6),MHCK7などを用いた。2)調節型myoDをマウス由来線維芽細胞に導入し、ex vivoおよびin vivoで骨格筋への分化誘導を行い、mdxマウスへの短縮型dystrophin遺伝子導入に成功した。(19.Kimura et al2008)3)作成した治療用ベクターをモデル動物(mdxマウス)に直接筋注した。長期的な発現を確認し、特に生理学的評価として骨格筋の収縮性・耐性の評価としてspecific forceとcontractionに対する耐性試験を行った。(11.Kimura et al 2010)4)またプロモーターの調節領域の詳細な検討のために、それぞれの発現カセットを含むベクターを用いTgMラインを作成した。骨格筋、心筋、多臓器の発現活性を検討し、プロモーター領域の組み合わせによる治療応用の可能性を提言した。(2.Suga et al 2011)