【本課題の目的】肺癌のドライバー癌遺伝子の一つ変異KRASは腺癌の20%程度に認められるが、その標的治療の開発は未成功である。これは変異KRASの癌化シグナルの薬物的な遮断が困難なためである。応募者は正常気管支モデルであるHBEC実験系を確立し(Sato, Cancer Res 2006)、さらに、変異KRASをHBECに導入すると悪性度の増強にもかかわらず細胞分裂を停止する現象を発見した(Sato, Mol Cancer Res 2013)。これは正常細胞が癌化を防御する機構の一つ癌遺伝子誘導細胞老化(oncogene-induced senescence; OIS)である。以上より、応募者は変異KRAS肺癌の新たな治療として変異KRASシグナルの遮断ではなく、OISを活用する治療を着想した。その実現のために、まず、HBECを用いて、OIS抑制作用を表現型とする機能的なプールshRNAスクリーニングを実施し、複数の標的候補を特定した。特に、肺癌細胞株が高発現する遺伝子Xは小分子化合物による治療標的となる可能性があるため、学内創薬産学協同研究センター(ラクオリア創薬株式会社)化合物スクリーニングを予定した(機密保持契約締結済み)。本研究はこれらの研究を発展させ、変異KRASならびに変異EGFRやALK遺伝子によるOIS誘導治療の開発を目的とする。【2018年度の成果】遺伝子Xのターゲットバリデーションを完了した。5万化合物のハイスループットスクリーニング(HTS)を実施しヒット化合物の再現性や化学構造に基づき、2018年12月までに候補化合物を10個まで絞り込んだ。また、遺伝子X阻害による増殖抑制のメカニズム解明のための実験を実施した。
- 著者
- 亀田 幸雄 大平 貞夫 松井 勝彦 金友 昭一 長谷 哲 阿津坂 巧
- 出版者
- The Pharmaceutical Society of Japan
- 雑誌
- Chemical and Pharmaceutical Bulletin (ISSN:00092363)
- 巻号頁・発行日
- vol.22, no.4, pp.938-944, 1974-04-25 (Released:2008-03-31)
- 被引用文献数
- 78 111
For the purpose of finding out a strain which has stronger cytolytic activity on Ehrlich ascites carcinoma cells, the authors isolated 113 strains of Bacillus natto from straws, which were collected at various areas in Japan, and measured the cytolytic activities by cylinder plate method. As the results, the authors found out a strain of Bacillus natto (tentatively called KMD 2311) which has the strongest cytolytic activity in the 113 strains. There were at least two kind of cytolytic substances on Ehrlich ascites carcinoma cells in the culture medium of Bacillus natto KMD 2311. One was extracted with AcOEt from the culture medium, which constitute approximately 20% of the cytolytic activity in the culture medium and it was stable. This cytolytic substance was purified and colorless crystalline compound (mp 247-249°) was obtained by recrystallization from acetone-petr. ether. Chemical structure of this compound was examined by elementary analysis, infrared, nuclear magnetic resonance, and mass spectroscopy and study of decomposed products. As the results, this compound was proved to be identical with surfactin (mp 140°), which was obtained from culture medium of Bacillus subtilis by Kakinuma, et al. and from Bacillus natto KMD 1126 by the authors. Melting point of this compound (mp 249°) was higher about 100° than that of surfactin (mp 140°), but high mp compound was obtained from surfactin by recrystallization from acetone-petr. ether. From these results, it was indicated that the cytolytic substance was identified with surfactin and dimorphic.