2 0 0 0 リバース・ジェネティクス法によるインフルエンザ生ワクチンの開発
インフルエンザは毎年のように高齢者やハイリスクグループの超過死亡の原因となっている。また前世紀には3度の世界的大流行を起こし、数千万人もの命を奪った。ワクチンは感染症予防において最も有効な手段のひとつである。現在わが国で使用されているインフルエンザワクチンは不活化ワクチンであり、症状の重篤化は予防できるが、感染そのものの予防には限界がある。米国で承認された弱毒生ワクチンは数アミノ酸が自然変異によって変化した弱毒化ウイルスであり、病原性復帰の危険性が指摘されている。1999年に我々が開発したリバース・ジェネティクス法により、任意に変異を導入したインフルエンザウイルスを人工合成することが可能になった。本研究では、リバース・ジェネティクス法を用いて、より安全かつ効果的なインフルエンザ生ワクチンの開発を目的とした。今回は、インフルエンザウイルス増殖に必須の蛋白質であるM2蛋白質に欠損変異を導入し、生ワクチン候補株となるかどうかを確認した。M2蛋白質に欠損変異を導入したウイルス株は、培養細胞を用いると親株と同様に効率よく増殖するが、マウスを用いた実験では弱毒化していることが明らかになった。このようにリバース・ジェネティクス法を用いることで、従来の生ワクチンよりも安全なワクチン株の作出が可能になったといえる。今後は、他のウイルス蛋白質にも人工的に変異を導入し、さらに安全で効果的なインフルエンザ生ワクチンの開発に努める。
- 著者
- 目野 郁子 岡田 賢司 山口 優子 諸熊 一則 大隈 邦夫 植田 浩司
- 出版者
- 一般社団法人 日本感染症学会
- 雑誌
- 感染症学雑誌 (ISSN:03875911)
- 巻号頁・発行日
- vol.74, no.2, pp.150-154, 2000-02-20 (Released:2011-02-07)
- 参考文献数
- 15
- 被引用文献数
- 1
乳幼児期に全菌体百日咳を含むジフテリア・破傷風・百日咳混合ワクチン (DTwP) の定期接種を受けた若年成人女性84名を対象にジフテリア, 破傷風および百日咳に対する抗体保有状況を調査した. 母子手帳の記載による84名のDTwP接種回数は, 1回4名, 2回5名, 3回23名および4回52名で, ワクチンを3回以上接種した者は全体の89.3%であった. ワクチン接種15~19年後のジフテリアおよび破傷風の抗毒素抗体陽性率 (0.011U/ml以上) は, それぞれ86.9%, 940%と高率であった. 百日咳では抗PT抗体価, 抗FHA抗体価の抗体陽性率 (10EU/ml以上) は357%, 559%と低率であった. 以上の結果からDTwP接種後15年以上経過してもジフテリア, 破傷風に関しては, 良好な抗体保有状況であったが, 百日咳に関しては, 感染防御レベル以上の抗体を保有するものは少なかった.
- 著者
- 坂田 眞砂代 河合 透 大隈 邦夫 伊原 博隆 平山 忠一
- 出版者
- The Pharmaceutical Society of Japan
- 雑誌
- Biological and Pharmaceutical Bulletin (ISSN:09186158)
- 巻号頁・発行日
- vol.16, no.11, pp.1065-1068, 1993-11-15 (Released:2008-04-10)
- 参考文献数
- 23
- 被引用文献数
- 11 12
We describe a method for the removal of endotoxins from various crude antigen solutions originating from gram-negative bacteria using aminated poly(γ-methyl L-glutamate) (PMLG) spherical particles. The aminated PMLG adsorbents showed high affinity for various purified endotoxins at an ionic strength of μ=0.1. The endotoxin-adsorbing capacity of the adsorbent increased with increase in the amino-group content of the adsorbent. The adsorbent (3.2 meq/g amino-group content) showed the highest affinity for endotoxin at ionic strengths ranging from μ=0.025-0.8. The adsorption of Bordetella pertussis antigen to the adsorbent decreased with increasing amino-group content of the adsorbent at an ionic strength of μ=0.2. The adsorption of B. bronchiseptica protein to the adsorbent increased with increasing amino-group content of the adsorbent, but decreased with increasing ionic strength. The adsorbent (3.2 meq/g of amino-group content) selectively reduced endotoxin in crude antigen solutions originating from gram-negative bacteria, B. pertussis, B. bronchiseptica and Pasteurella multocida, even at a high ionic strength (μ=0.2-0.4) without affecting the recovery of the protective antigens.
- 著者
- 平山 忠一 坂田 眞砂代 大倉 幸洋 伊原 博隆 大隈 邦夫
- 出版者
- The Pharmaceutical Society of Japan
- 雑誌
- Chemical and Pharmaceutical Bulletin (ISSN:00092363)
- 巻号頁・発行日
- vol.40, no.8, pp.2106-2109, 1992-08-25 (Released:2008-03-31)
- 参考文献数
- 16
- 被引用文献数
- 10 10
Attempts were made to prepare adsorbents having a high affinity for endotoxin in the culture supernatant of Bordetella pertussis. When poly(γ-methyl L-glutamate) (PMLG) was used as a matrix and amino groups as the ligand, the highest affinity for endotoxin was attained even at a high ionic strength (μ=0.2-0.4). PMLG beads containing amino groups of about 3.2 meq/g selectively removed endotoxin from the culture supernatant of B. pertussis without affecting the protective antigens. It was demonstrated that 1 ml of the wet adsorbent adsorbed 4.5 mg of endotoxin. The beads of PMLG derivatives, therefore, are considered to be a useful adsorbent for the removal of endotoxin from the pertussis vaccine, affecting neither filamentous hemagglutinin nor pertussis toxin.