著者

今中 忠行

出版者

Japanese Society of Microbial Ecology / Japanese Society of Soil Microbiology / Taiwan Society of Microbial Ecology / Japanese Society of Plant Microbe Interactions / Japanese Society for Extremophiles

雑誌

Microbes and Environments (ISSN:13426311)

巻号頁・発行日

vol.13, no.3, pp.171-175, 1998-09-30 (Released:2009-10-05)

参考文献数

11

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It has been understood as a common sense that petroleum can be oxidized by the microorganisms in the presence of molecular oxygen. In contrast, we isolated an extremely interesting bacterium strain HD-1 which could assimilate petroleum under anaerobic condition. The bacterium could grow on CO2 as a sole carbon source, and produced n-alkane/alkene, major components of petroleum.

著者

森川 正章 金 沙 金谷 茂則 今中 忠行

出版者

社団法人日本農芸化学会

雑誌

日本農藝化學會誌 (ISSN:00021407)

巻号頁・発行日

vol.72, no.4, pp.532-534, 1998-04-01

被引用文献数

1

著者

今中 忠行 森川 正章

出版者

大阪大学

雑誌

一般研究(B)

巻号頁・発行日

1993

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【1】HD-1株宿主-ベクター系の開発HD-1株を宿主とした形質転換系を構築することを目的としてまず、各種抗生物質に対する耐性をしらべた。その結果、カナマイシン(Km)、テトラサイクリン(Tc)、アンピシリン(Ap)、クロラムフェニコール(Cm)、カルベニシリン(Cd)に対する耐性は全くなく(5μg/ml以下)、ストレプトマイシン(Sm)に対しては10μg/mlが生育限界濃度であった。続いてこれまでに開発されたPseudomonas属を含むグラム陰性細菌に広く利用されている広宿主域ベクターや大腸菌用のベクターなどを中心にエレクトロポレーション法によるHD-1株の形質転換実験を行った。それぞれのベクターにコードされている各種薬剤耐性を獲得した細胞を形質転換体として選択した。その結果、グラム陰性用広宿主域ベクターRSF1010によってHD-1株の形質転換が可能であることが判った。細胞を懸濁する溶液としては10%グリセロールが適していると思われた。実際に、Sm耐性株(形質転換体)からプラスミドを抽出してアガロースゲル電気泳動で調べた結果、RSF1010の存在が確認できた。この結果は、RSF1010はHD-1株細胞内で独立複製可能であることも示している。種々の条件を検討した結果、HD-1株の形質転換最適条件は以下の通りである。宿主(HD-1株),定常期前期菌体:ベクター,RSF1010(Sm^r):選択圧,Sm20μg/ml:電気パルス(方形波):電界強度,5kV/cm:パルス幅,1ms:遺伝子発現までの培養時間,3時間。以上の条件で得られる最大形質転換頻度は3.3×10^<-5>transformants/viable cell、最大形質転換効率は1.1×10^5transformants/μgDNAであった。【2】アルカン/アルケン生合成経路の解明まず、生物学的にCO_2からアルカン/アルケンを合成する経路のなかで最も研究が遅れており、実際反応律速になっている可能性が高いと思われる脂肪酸からアルカン/アルケンへの変換反応について検討した。緑藻類などを用いた研究成果からは脂肪酸から直接アルカン/アルケンを合成しているのではなく、脂肪酸からアルデヒドになった後アルカン/アルケンに変換される可能性が示唆されている。そこでHD-1株が最も多く蓄積していたヘキサデカン(C16)の前駆物質であると予想されるパルミチン酸あるいはヘキサデカナ-ルを使ってアルカン/アルケンの生成が実際に起こるかを調べた。^<14>C-パルミチン酸は市販のものを利用した。^<14>C-MEKISAデカナ-ルは入手不可能であったため^<14>C-パルミチン酸から化学合成した。アルカン/アルケンの生成反応は以下のようにして行った。基質である^<14>-パルミチン酸あるいは^<14>C-ヘキサデカナ-ルを含むリン酸緩衝液(pH7.0)/1%Triton X-100をナスフラスコ内でArガス通気により脱酸素処理する。同様に脱酸素処理した細胞抽出液を嫌気性ボックス内で添加後密栓する。これを遮光した湯浴中で37℃24時間保温した。反応産物を含む疎水性画分をクロロホルム抽出し、基質のみで保温したコントロールと共にシリカゲル60TLC(ヘキサンおよびヘキサン,ジエチルエーテル,ギ酸)で展開し、脂肪酸あるいはアルデヒド画分(Rf=0.5-0.7)をアルカン/アルケン画分(Rf=0.9以上)を厳密に分けて回収した。液体シンチレーションカウンターによりそれぞれの放射活性を測定した。この結果から、微量であるが細胞抽出液を加えた場合にのみアルカン/アルケの生成が確認できた。さらに脂肪酸にくらべてアルデヒドの方がアルカン/アルケンの生成率が良いことから、細菌においても脂肪酸はアルデヒドを経由してアルカン/アルケンに変換されることが強く示唆された。現在細胞抽出液をカラムクロマトグラフィーなどにより分画して、本酵素活性(アルデヒトデカルボニラーゼ)の精製を目指している。

著者

北林 雅夫 小松原 秀介 今中 忠行

出版者

公益社団法人 日本農芸化学会

雑誌

化学と生物 (ISSN:0453073X)

巻号頁・発行日

vol.53, no.12, pp.866-871, 2015-11-20 (Released:2016-11-20)

参考文献数

8

著者

森川 正章 金 沙 金谷 茂則 今中 忠行

出版者

公益社団法人 日本農芸化学会

雑誌

日本農芸化学会誌 (ISSN:00021407)

巻号頁・発行日

vol.72, no.4, pp.532-534, 1998-04-01 (Released:2009-02-23)

参考文献数

15

著者

今中 忠行

出版者

公益社団法人 日本農芸化学会

雑誌

化学と生物 (ISSN:0453073X)

巻号頁・発行日

vol.54, no.9, pp.613, 2016-08-20 (Released:2017-07-20)

著者

吉川 祐子 小川 直樹 香川 幸大 剣持 貴弘 森 利明 渡辺 好章 吉川 研一 今中 忠行

出版者

公益社団法人 日本ビタミン学会

雑誌

ビタミン (ISSN:0006386X)

巻号頁・発行日

vol.88, no.5, 2014

著者

今中 忠行

出版者

中部大学生物機能開発研究所

雑誌

生物機能開発研究所紀要 (ISSN:18807941)

巻号頁・発行日

no.9, pp.11-38, 2009-03

著者

今中 忠行

出版者

日本生物工学会

雑誌

生物工学会誌 : seibutsu-kogaku kaishi (ISSN:09193758)

巻号頁・発行日

vol.80, no.1, pp.2-9, 2002-01-25

参考文献数

15

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There are a huge number of microorganisms in the extreme environment. For example, we can isolate many extremophiles such as hyperthermophiles, psychrophiles, and so on. The phylogenetic tree based on 16S rRNA or protein sequences shows that all organisms have a common ancestor. All organisms are divided into three groups, eucarya, bacteria, and archaea. Thermococcus kodakaraensis KOD1 is a newly isolated hyperthermophilic archaeon from a hot spring at a wharf of Kodakara Island, Kagoshima, Japan. The optimum temperature for KOD1 cell growth is 95℃. The KOD1 strain possesses a circular genome, whose sequence has been determined (approximately 2076 kb). Most enzymes from KOD1 are extremely thermostable and the reason for thermostability was analyzed by determining the tertiary structure of those enzymes. A rapid and efficient method of amplifying specific DNA sequences by KOD1 DNA polymerase and characteristics of glutamate dehydrogenase, DNA ligase, and Rubisco are introduced here.

著者

今中 忠行 海江田 豪児 田口 久治

出版者

公益社団法人日本生物工学会

雑誌

醗酵工學雑誌 (ISSN:03675963)

巻号頁・発行日

vol.51, no.6, pp.423-430, 1973-06-25

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前報で, 菌体増殖および酵素生産に関する動力学モデルを提出した.本報では, まずgalactose取り込みの制限条件を検討した結果, glucoseの添加によりgalactoseの細胞内への取りこみはon-off方式でただちに完全に阻害されること, およびgalactoseの細胞膜透過系は構成的であることが判明した.またこれらの事実より, 酵素誘導に長時間を要する主因は, galactoseの膜透過系にあるのではなく, 細胞内の諸反応と細胞内での物質移動であると考えられる.さらに本モデルを用いて酵素誘導とその抑制, glucoseとgalactoseを含む回分培養および連続培養の非定常過程の実験結果をすべて十分に説明すつことができた.以上のことから, 本モデルと解析に用いた諸定数を最適化の計算に用いる妥当性十分と判定した.

著者

長沼 毅 今中 忠行 伊村 智 内田 雅己 大谷 修司 神田 啓史 黒沢 則夫 幸島 司郎 高野 淑識 東條 元昭 伴 修平 福井 学 星野 保 宮下 英明 吉村 義隆

出版者

広島大学

雑誌

基盤研究(A)

巻号頁・発行日

2006

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本研究は地球環境の健康診断「国際極年」の中核計画として実施されたものである。地球環境変動のうち温暖化の影響は南北両極、特に環境変動に鋭敏に応答する微生物の生態に顕著に現れる。そこで本研究では初めて総合的な極地微生物の生態調査を行った。極域および高山氷河域に生息する微生物の種類と現存量および固有種・汎存種を調べることで、今後の変遷を評価する上で必要になる「国際極年参照データ」を残すことができた。